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Transgênicos - Linhagens em Manutenção

Estas são as linhagens transgênicas mantidas atualmente no Biotério Central da FMUSP.
As linhagens indicadas em vermelho têm alguma restrição de fornecimento.
Para maiores informações, entre em contato com o setor de Transgênicos: 3061 8504. 

B6 Hspg2
nome_completo:Hspg2tm1Ref
background:C57Bl/6
nome do alelo:heparan sulfate proteoglycan 2
tipo do alelo:Knockout
símbolo do gene:Hspg2
nome do gene:Perlecan
Características (fenótipo): Mice heterozygous for the mutation appeared normal and_did not display any overt anatomical or_behavioral abnormalities. No mice homozygous for the mutation were detected among 728 weaned progeny from_heterozygous intercrosses . Analysis of newborn offspring detected three homozygotes and_several cannibalized mice among 98 neonates . The three homozygotes showed exencephaly, chondrodysplasia, hemorrhage in several organs (see below), severe cleft palates, and_died around birth.
Caracterização genética (genótipo): Costell M; Gustafsson E; Aszódi A; Mörgelin M; Bloch W; Hunziker E; Addicks K; Timpl R; Fässler R. Perlecan maintains the integrity of cartilage and_some basement membranes. Journal of Cell Biology. 1999: 147 (5) 1109?1122. dextro-looped transposition of the great arteries 1 (IDs) Silverman-Handmaker type dyssegmental dysplasia (IDs) Origem: IB-USP (Lygia da Veiga Pereira) . No Biotério Central em 2018
B6 Hspg2
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B6EiC3Sn.BLiA-Ts(1716)65Dn/DnJ (SPF)
nome_completo:B6EiC3Sn.BLiA-Ts(1716)65Dn/DnJ
background:B6EiC3Sn
nome do alelo:trisomy, Chr 16 translocation to Chr 17, Davisson 65
tipo do alelo:Radiation induced
símbolo do gene:Ts(1716)65Dn
nome do gene:trisomy, Chr 16 translocation to Chr 17, Davisson 65
Características (fenótipo): Trisomic mice with the wild-type allele of Pde6b, are similar to the B6EiC3Sn-a/A-Ts(1716)65Dn/J (Stock No. 001924) trisomic mice in that they display slightly shorter body length and_lower body weight), show reduced grip strength, nocturnal hyperactivity, and_impaired performance in the Morris water maze. Any differences in the Morris water maze tests for the two genetic backgrounds were found to be very subtle. An attribute that distinguishes this line from_Stock No. 001924, is that these are ’sighted Ts65Dn’ mice. Specifically, these mice are homozygous for the wild-type allele of Pde6b and_thus all of the trisomic mice generated can be utilized in studies without the complication of retinal degeneration.
Caracterização genética (genótipo): The Pde6b+ wild-type allele in the F1 hybrid, B6EiC3Sn.BLiAF1 (Stock No. 003647) also called B6EiC3Sn.Bli, was utilized to create a Ts65Dn strain without blindness. A Ts65Dn trisomic female from_B6EiC3Sn a/A-Ts(1716)65Dn (Stock No. 001924) was crossed to an F1 hybrid male and_this was repeated for 5 generations before phenotypic analysis. This strain has been maintained by continuous crossing of a Ts65Dn trisomic female to the Stock No. 003647 F1 hybrid. Costa AC; Stasko MR; Schmidt C; Davisson MT. 2010. Behavioral validation of the Ts65Dn mouse model for Down syndrome of a genetic background free of the retinal degeneration mutation Pde6b(rd1). Behav Brain Res 206(1):52-62PubMed: 19720087MGI: J:153579 Reinholdt LG; Ding Y; Gilbert GT; Czechanski A; Solzak JP; Roper RJ; Johnson MT; Donahue LR; Lutz C; Davisson MT. 2011. Molecular characterization of the translocation breakpoints in the Down syndrome mouse model Ts65Dn. Mamm Genome 22(11-12):685-91PubMed: 21953412MGI: J:178871 Ahmed MM; Sturgeon X; Ellison M; Davisson MT; Gardiner KJ. 2012. Loss of Correlations among Proteins in Brains of the Ts65Dn Mouse Model of Down Syndrome. J Proteome Res 11(2):1251-63PubMed: 22214338MGI: J:180732
B6EiC3Sn.BLiA-Ts(1716)65Dn/DnJ (SPF)
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B6EiC3Sn.BLiAF1/J
nome_completo:
background:
nome do alelo:
tipo do alelo:
símbolo do gene:
nome do gene:
Características (fenótipo): This F1 hybrid is made by crossing C57BL/6JEiJ females (Stock No. 000924) with C3Sn.BLiA-Pde6b+/Dn (Stock No. 003648). The F1 hybrid offspring are segregating for agouti/nonagouti and_are homozygous for the wildtype allele of Pde6b (and thus have normal vision).
Caracterização genética (genótipo): This F1 hybrid is made using a C3H parent that is congenic for the wild-type allele of Pde6b. Thus, this F1 hybrid is useful for maintaining fragile mutations on a mixed background without the confounding retinal degeneration that is normally found in C3H strains.
B6EiC3Sn.BLiAF1/J
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B6EiC3SnF1
nome_completo:B6EiC3SnF1
background:F1 - Misto (C57BL/6JEiJ x C3H/HeSnJ)
nome do alelo:
tipo do alelo:
símbolo do gene:
nome do gene:
Características (fenótipo): These F1 (first filial generation) hybrid mice are the offspring of a cross between C57BL/6JEiJ females (B6Ei) and_C3H/HeSnJ males (C3Sn). F1 hybrid mice are heterozygous at all loci where_the parental strains have different alleles, and_like inbred mice they are genetically and_phenotypically uniform. F1 hybrids are often used for hybrid vigor, as a background for some deleterious mutations, for tissue transplantation, to determine the mode of inheritance, to create or_enhance expression of polygenic diseases, and_to provide physiological buffering (present a broader array of responses to various stresses).
Caracterização genética (genótipo): Jackson Lab : B6EiC3SnF1/J Stock No: 001875
B6EiC3SnF1
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CRAMP (SPF)
nome_completo:B6.129X1-Camptm1Rlg/J  
background:C57BL/6J
nome do alelo:Camptm1Rlg
tipo do alelo:Targeted (Null/Kockout)
símbolo do gene:Camp
nome do gene:cathelicidin antimicrobial peptide
Características (fenótipo): The mouse Camp gene is an ortholog of the human gene CAMP, which encodes the precursor of cathelicidin antimicrobial peptide LL-37 (or CRAMP in mouse). Expressed mucosal epithelial cells, circulating neutrophils, and_myeloid bone marrow cells, Camp is an essential part of the first line of defense against infection. In addition to antimicrobial activity, cathelicidin antimicrobial peptide plays a role in NK cell-mediated tumor growth suppression, and_when secreted by neutrophils acts, as an attractant for monocytes, promoting wound healing or_angiogenesis. Mouse CRAMP is implicated in adaptive immune response regulation and_can interfere with TLR function via interactions with hyaluronan. Mice deficient in CRAMP are more susceptible to experimentally induced necrotic skin infection with Group A Streptococcus, urinary tract infection with uropathogenic E. coli, Pseudomonas aeruginosa infection, and_meningococcal Neisseria meningitidis infection. Skin lesions, due to Group A Streptococcus infection, are larger and_persist longer in homozygotes when compared to controls. Heterozygotes exhibit an intermediate Group A Streptococcus bacterial susceptibility phenotype. Within 1 hour of infection, more uropathogenic E. coli bacteria are attached to urinary bladder mucosa of mutant mice. 48 hours after infection, the number of bacteria in the urinary tract of homozygous mice is higher than wildtype controls. Mutant mice challenged with uropathogenic E. coli developed more severe urinary tract infections and_exhibit higher mortality from_septicemia when compared to controls.
Caracterização genética (genótipo): A targeting vector containing a PGK-neo cassette was used to disrupt exons 3 and_4. The construct was electroporated into unspecified 129X1/SvJ derived embryonic stem (ES) cells. Correctly targeted ES cells were injected into C57BL/6 blastocysts. The resulting chimeric animals were crossed to 129/SvJ female mice, and_then backcrossed to C57BL/6J for seven generations. Upon arrival at The Jackson Laboratory, the mice were crossed to C57BL/6J (Stock No. 000664) at least once to establish the colony. Nizet V; Ohtake T; Lauth X; Trowbridge J; Rudisill J; Dorschner RA; Pestonjamasp V; Piraino J; Huttner K; Gallo RL. 2001. Innate antimicrobial peptide protects the skin from_invasive bacterial infection. Nature 414(6862):454-7PubMed: 11719807MGI: J:72924 jackson lab Cat N. 017799 Importado por Fabiano Pinheiro da Silva LIM 51 / No Bioterio central 2017
CRAMP (SPF)
Foxp3DTR
nome_completo:B6.129(Cg)-Foxp3tm3(DTR/GFP)Ayr/J
background:C57BL/6J
nome do alelo:targeted mutation 3, Alexander Rudensky
tipo do alelo:Targeted Knockin
símbolo do gene:Foxp3
nome do gene:forkhead box P3
Características (fenótipo): Foxp3DTR knock-in mice express the human diphtheria toxin receptor and_EGFP genes from_the Foxp3 locus--without disrupting expression of the endogenous Foxp3 gene. These mice may be useful for regulatory T cell visualizing and_ablation.
Caracterização genética (genótipo): The Foxp3DTR targeting vector was designed with an internal ribosome entry site (IRES), a human diphtheria toxin receptor (DTR), and_an enhanced green fluorescent protein (EGFP), followed by a frt-flanked neomycin (neo) resistance cassette inserted downstream of the internal stop codon of the X-linked forkhead box P3 (Foxp3) gene. This construct was injected into (129X1/SvJ x 129S1/Sv)F1-Kitl+-derived R1 embryonic stem (ES) cells. Correctly targeted ES cells were injected into C57BL/6 blastocysts. The donating investigator reported that the resulting mice were backcrossed to C57BL/6NTac mice for at least 8 generations (see SNP note below). Upon arrival at The Jackson Laboratory, mice were bred to C57BL/6NJ inbred mice (Stock No. 005304) for at least one generation.
Foxp3DTR
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KPTN (Convencional)
nome_completo:Kptn
background:C57BL/6
nome do alelo:Crispr/cas9 Kptn
tipo do alelo:Knockout
símbolo do gene:Kptn
nome do gene:Kptn
Características (fenótipo): Alteração na pressão arterial e/ou frequência cardíaca.
Caracterização genética (genótipo): Os animais KOs foram obtidos a partir da técnica CRISPR/Cas9. Sítios alvos de CRISPR para genes de interesse foram escolhidos por meio da ferramenta CRISPR Design (crispr.mit.edu). Oligos de DNA dupla fita correspondente a cada alvo de CRISPR foram sintetizados, associados e clonados no plasmídeo pX330 (Addgene) [43]. Células Neuro-2A foram transfectadas com plasmídeos da CRISPR e foram submetidas ao ensaio para determinar a atividade da CRISPR. Para transcrição in vitro do RNA guia da CRISPR (sgRNA) e do RNAm da cas9, o promotor T7 foi adicionado ao template por PCR. Os produtos de PCR foram purificados utilizando o kit QiaQuick Purification (Qiagen) e serviram como template para a transcrição in vitro do sgRNA com o kit T7 Quick High Yield RNA Synthesis (New England Biolabs) e do RNAm da cas9 com o kit mMESSAGE mMACHINE T7 ULTRA (Life Technologies). Tanto o sgRNA, como o RNAm da cas9 foram purificados utilizando o kit MEGAclear (Life Technologies) e aluídos em água livre de RNase. Fêmeas C57BL/6J foram superovuladas através da injeção de 6,5 U de gonadotropina de soro de égua gravida (PMSG; Millipore, 367222) e de 6,5U de gonadotropina coriônica humana (hCG; Sigma-Aldrich, C1063) após 24 horas. As fêmeas superovuladas foram colocadas para acasalar com machos C57BL/6JJcl por um dia. No dia seguinte, óvulos fecundados foram coletados dos ovidutos da fêmea e o RNAm da cas9 transcrito in vitro (50ng/ul), assim como o sgRNA (20-50 ng/ul) serão injetados no pronucleo ou no citoplasma dos óvulos fecundados. Os embriões que receberam a injeção foram, então, cultivados em meio M16 (Sigma-Aldrich, M7292) a 37 °C e 5% de CO2. Para produção de animal mutante, embriões em estágio de duas células foram transferidos no oviduto (entre 10-20 embriões por oviduto) em fêmeas Hsd:CR (CD-1) pseudogravidas. Origem: UT Southwestern Medical Center USA Dallas, Texas. No Biotério Central em 2019 Docente Responsável: José Eduardo Krieger INCOR LIM13
KPTN (Convencional)
MMTV-PyMT (SPF)
nome_completo:B6.FVB-Tg(MMTV-PyVT)634Mul/LellJ
background:C57BL/6J
nome do alelo:transgene insertion 634, William Muller
tipo do alelo:Transgenic (Inserted expressed seq)
símbolo do gene:Tg(MMTVPyVT)634Mul
nome do gene:transgene insertion 634, William Muller
Características (fenótipo): Adenocarcinomas arise in virgin and_breeder females and_occasionally in males, which are well-differentiated, multifocal and_eventually involve the entire mammary fat pad. Tumor-bearing females have reduced lung metastasis compared to the 80-90% incidence found in FVB/N-Tg(MMTV-PyVT)634Mul/J mice. Transgene expression is detected at high levels in male and_female mammary glands. Lower levels are detected in salivary gland, seminal vesicles, ovaries, and_lungs (believed to be the result of pulmonary metastases).
Caracterização genética (genótipo): Importado pelo Bioterio Central da Jackson #: 022974 em 2017 Davie SA; Maglione JE; Manner CK; Young D; Cardiff RD; MacLeod CL; Ellies LG. 2007. Effects of FVB/NJ and_C57Bl/6J strain backgrounds on mammary tumor phenotype in inducible nitric oxide synthase deficient mice. Transgenic Res 16(2):193-201PubMed: 17206489MGI: J:121391
MMTV-PyMT (SPF)
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NSG-SGM3
nome_completo:NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl Tg(CMV-IL3,CSF2,KITLG)1Eav/MloySzJ
background:NOD
nome do alelo:Prkdcscid, Il2rgtm1Wjl,Tg(CMV-IL3,CSF2,KITLG)1Eav
tipo do alelo:Triplo (Spontaneous, Targeted KO, Transgenic
símbolo do gene:
nome do gene:
Características (fenótipo): When maintaining a live colony, females homozygous for scid (Prkdcscid), homozygous for the X-linked Il2Rγcnull (Il2rgtm1Wjl) and_homozygous for the SGM3 transgenes (Tg(CMV-IL3,CSF2,KITLG)1Eav) may be bred with males homozygous for scid, hemizygous for the X-linked Il2Rγcnull and_homozygous for the SGM3 transgenes. Jackson : # 013062 Origem: FMRP (11/2020) / 5 casais
Caracterização genética (genótipo): Three separate transgenes were designed each carrying either the human interleukin-3 gene (IL3; IL-3), the human granulocyte/macrophage-stimulating factor gene (CSF2; GM-CSF), or_the human Steel factor gene (KITLG; SCF or_SF). Expression of each gene is driven by a human cytomegalovirus promoter/enhancer sequence, and_is followed by a human growth hormone cassette and_a polyadenylation (polyA) sequence. The transgenes were microinjected into fertilized C57BL/6xC3H/HeN oocytes. The resulting founders, carrying all three transgenes (3GS) were backcrossed to BALB/c-scid/scid mice for several generations and_subsequently backcrossed to NOD.CB17-Prkdcscid mice for at least 11 generations. These mice were bred to NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl mice, and_were then interbred until all offspring were homozygous for 3GS and_the IL2rg targeted mutation. Upon arrival at The Jackson Laboratory, transgenic mice were bred to NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ mice (Stock No. 005557) for one generation to establish the colony. Thereafter, females homozygous for Prkdcscid, homozygous for Il2rgtm1Wjl and_homozygous for the 3GS transgenes were bred with males homozygous for Prkdcscid, hemizygous for the X-linked Il2rgtm1Wjl and_homozygous for the 3GS transgenes. Billerbeck E; Barry WT; Mu K; Dorner M; Rice CM; Ploss A. 2011. Development of human CD4+FoxP3+ regulatory T cells in human stem cell factor-, granulocyte-macrophage colony-stimulating factor-, and_interleukin-3-expressing NOD-SCID IL2R{gamma}null humanized mice. Blood 117(11):3076-86PubMed: 21252091MGI: J:170510 Bryce PJ; Falahati R; Kenney LL; Leung J; Bebbington C; Tomasevic N; Krier RA; Hsu CL; Shultz LD; Greiner DL; Brehm MA. 2016. Humanized mouse model of mast cell-mediated passive cutaneous anaphylaxis and_passive systemic anaphylaxis. J Allergy Clin Immunol 138(3):769-779PubMed: 27139822MGI: J:231799 Coughlan AM; Harmon C; Whelan S; O’Brien EC; O’Reilly VP; Crotty P; Kelly P; Ryan M; Hickey FB; O’Farrelly C; Little MA. 2016. Myeloid Engraftment in Humanized Mice: Impact of Granulocyte-Colony Stimulating Factor Treatment and_Transgenic Mouse Strain. Stem Cells Dev 25(7):530-41PubMed: 26879149MGI: J:230785 Wunderlich M; Chou FS; Link KA; Mizukawa B; Perry RL; Carroll M; Mulloy JC. 2010. AML xenograft efficiency is significantly improved in NOD/SCID-IL2RG mice constitutively expressing human SCF, GM-CSF and_IL-3. Leukemia 24(10):1785-8PubMed: 20686503MGI: J:166359
NSG-SGM3
PDI (SPF)
nome_completo:FVB/NJ-Tg(Ubq-Ratp4hb-Myc)6Frml
background:FVB/NJ
nome do alelo:Myc (9 aminoácidos para reconhecimento do anticorpo anti-Myc) na porção C-terminal
tipo do alelo:Transgenic (Inserted expressed seq)
símbolo do gene:PDIA1
nome do gene:dissulfeto isomerase proteica
Características (fenótipo): Camundongos com superexpressão constitutiva (i.e., não induzível) e ubíqua (i.e., não órgão-específica) de PDI.
Caracterização genética (genótipo): Para o desenvolvimento de camundongos que superexpressam a PDIA1, foram realizadas seis etapas: (1) foi escolhido o meio para inserir o plasmídeo com o gene superexpressor (gentilmente cedido pelo laboratório do Prof. Tomohiro Nakamura, Japão) no embrião; (2) construiu-se o vetor de DNA (utilizamos essa construção da PDIA1 de rato, que contém a inserção de Myc (9 aminoácidos para reconhecimento do anticorpo anti-Myc) na porção C-terminal. Esses experimentos foram realizados em colaboração com o serviço da recente facility do Laboratório de Modificação do Genoma (LMG, LNBio) coordenado pelo pesquisador Dr. José Xavier Neto); (3) o plasmídeo foi inserido no embrião e gerou camundongos fundadores; (4) linhagens foram estabilizadas; (5) os embriões foram congelados; (6) três linhagens foram inicialmente escolhidas para a realização de experimentos. A infecção lentiviral, realizada com auxílio do Laboratório de Vetores Virais (LVV, LNBio), coordenado pelo pesquisador Dr. Marcio Chaim Bajgelman, foi a forma utilizada para inserir o plasmídeo no embrião. Esse meio apresenta maior eficiência, permitindo a infecção de células que estão se dividindo e das que não estão. Porém, ao contrário dos retrovírus, os lentivírus não são silenciados. Para a construção do vetor de DNA, utilizou-se o plasmídeo FUGW (Viral Vectors Lab-LNBio) derivado de bactérias para propagar o DNA do plasmídeo. Os lentivírus infectados com esse DNA bacteriano foram “empacotados” e injetados em altas concentrações no embrião desnudado (sem zona pelúcida). Esses embriões cresceram in vitro até o estágio de mórula/blastocisto e, então, foram implantados no útero de fêmeas pseudo-grávidas. Foram recebidos 7 camundongos fundadores. Devido ao mosaicismo genético, esses fundadores foram utilizados somente para a procriação, dando origem a 7 linhagens: P01, P02, P03, P04, P05, P06 e P07. A estabilização das linhagens foi feita com base no resultado de genotipagem por PCR (região WPRE) e da confirmação da sensibilidade ao genótipo. Através de um cruzamento de descendentes da linhagem 6, foi obtida uma nova linhagem (8). Essas duas linhagens (6 e 8) além de terem o genótipo transgênico confirmado, superexpressam a PDIA1 e, portanto, foram selecionados para a realização da análise histológica. A linhagem 6, particularmente, tem-se mostrado bastante homogênea até a quinta geração, indicando que a inserção do gene deva ter ocorrido em locais não sensíveis do genoma. Esses camundongos expressam consistentemente o mRNA e a proteína PDIA1 em diferentes tecidos.
PDI (SPF)
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Prop1 (Ames)
nome_completo:
background:
nome do alelo:
tipo do alelo:
símbolo do gene:
nome do gene:
Características (fenótipo): ---
Caracterização genética (genótipo): Ames dwarf mice, Prop1df/df are homozygous for the spontaneous mutation p.S83P, c.475C>T (ENSMUST00000051159). Mice were obtained from_Dr. Andrez Bartke (DF/B) and_maintained as a non-inbred, mixed stock at University of Michigan and_University of São Paulo. Similar mice are available from_the Jackson Laboratory (Oca2p, Prop1df/J; Stock number 001618). Mice were genotyped by PCR using the primers 5? GAG CTG GGG AGA CCT AAG CTT TGC C 3? and_5? GCC CAG ATG TCA GGA TAC TG 3?, followed by PCR product digestion with Van91I.
Prop1 (Ames)
Psen1(SPF)
nome_completo:B6.129-Psen1tm1Mpm/J
background:C57BL/6
nome do alelo:targeted mutation 1, Mark P Mattson
tipo do alelo:Knockin
símbolo do gene:Psen1
nome do gene:presenilin 1
Características (fenótipo): Alzheimer\’s disease-linked
Caracterização genética (genótipo): A targeting vector containing neomycin resistance and_herpes simplex virus thymidine kinase genes was utilized in constructing this mutant. A mutagenized DNA sequence of exon 5 of the mouse Psen1 gene was targeted for the Psen1 allele. The construct was electroporated into 129X1/SvJ x 129S1/Sv-derived R1 embryonic stem (ES) cells. Correctly targeted ES cells were injected into recipient blastocysts. The resulting chimeric male animals were bred to C57BL/6 females to produce mice heterozygous for the mutation. These mice were then bred to a CMV-cre transgenic strain to delete_the neo cassette from_the targeted allele. Guo Q; Fu W; Sopher BL; Miller MW; Ware CB; Martin GM; Mattson MP. 1999. Increased vulnerability of hippocampal neurons to excitotoxic necrosis in presenilin-1 mutant knock-in mice. Nat Med 5(1):101-6PubMed: 9883847MGI: J:51950
Psen1(SPF)
Tg(K18-ACE2)
nome_completo:B6.Cg-Tg(K18-ACE2)2Prlmn/J
background:C57BL/6
nome do alelo:transgene insertion 2, Stanley Perlman
tipo do alelo:Transgenic (Inserted expressed sequence)
símbolo do gene:Tg(K18-ACE2)2Prlmn
nome do gene:transgene insertion 2, Stanley Perlman
Características (fenótipo): Importado da Jackson (#034860) por Edilberto Postol em 2020 . No Biotério Central em 2020
Caracterização genética (genótipo): McCray PB Jr; Pewe L; Wohlford-Lenane C; Hickey M; Manzel L; Shi L; Netland J; Jia HP; Halabi C; Sigmund CD; Meyerholz DK; Kirby P; Look DC; Perlman S. 2007. Lethal infection of K18-hACE2 mice infected with severe acute respiratory syndrome coronavirus. J Virol 81(2):813-21PubMed: 17079315MGI: J:283648 Oladunni FS; Park J-G; Tamayo PP; Gonzalez O; Akhter A; Allue-Guardia A; Olmo-Fontanez; Shalini Gautam A; Garcia-Vilanova A; Ye C; Chiem K; Headley C; Dwived V; Parodi LM; Alfson KJ; Staples HM; Schami A; Garcia JI; Whigham A; Platt II RN; Gazi M; Martinez J; Chuba C; Earley S; Rodriguez OH; Mdaki SD; Kavelish KN; Escalona R; Hallam CRA; Christie C; Patterson JL; Anderson TJC; Carrion Jr R; Dick Jr EJ: Hall-Ursone S; Schlesinger LS; Kaushal D; Giavedoni LD; Alvarez X; Turner J; Martinez-Sobrido L; Torrelles JB. 2020. Lethality of SARS-CoV-2 infection in K18 human angiotensin converting enzyme 2 transgenic mice bioRxivMGI: J:291118
Tg(K18-ACE2)
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TLR4 (Convencional)
nome_completo:C57BL/10ScNJ
background:C57BL/10ScN
nome do alelo:defective lipopolysaccharide response, deletion
tipo do alelo:Spontaneous mutation
símbolo do gene:Tlr4
nome do gene:toll-like receptor 4
Características (fenótipo): --_-
Caracterização genética (genótipo): The breeder pair of C57BL/10ScN mice, obtained from_NIH, that were the progenitors of all mice of this strain at The Jackson Laboratory were tested by PCR analysis for the spontaneous Il12rb2 mutation described by Poltorak et al. (J. Immunol. 167:2106-2111, 2001) and_found to carry only the wild type Il12rb2 allele. C57BL/10ScN mice have a deletion of the Tlr4 gene that results in absence of both mRNA and_protein and_thus in defective response to LPS stimulation. Tlr4lps-del differs from_the Tlr4Lps-d mutation of C3H/HeJ mice, a point mutation that causes an amino acid substitution. The allele for normal LPS response, Tlr4lps-n, occurs in most other C3H and_C57BL/10 substrains and_most other mouse strains. Petkov PM; Cassell MA; Sargent EE; Donnelly CJ; Robinson P; Crew V; Asquith S; Haar RV; Wiles MV. 2004. Development of a SNP genotyping panel for genetic monitoring of the laboratory mouse. Genomics 83(5):902-11PubMed: 15081119MGI: J:89298
TLR4 (Convencional)
Tnc (1pb)
nome_completo:Tnc (1pb)
background:C57BL/6
nome do alelo:Crispr/cas9 Tnc
tipo do alelo:knockout
símbolo do gene:Tnc
nome do gene:Tnc
Características (fenótipo): Alteração na pressão arterial e/ou frequência cardíaca.
Caracterização genética (genótipo): Os animais KOs foram obtidos a partir da técnica CRISPR/Cas9. Sítios alvos de CRISPR para genes de interesse foram escolhidos por meio da ferramenta CRISPR Design (crispr.mit.edu). Oligos de DNA dupla fita correspondente a cada alvo de CRISPR foram sintetizados, associados e clonados no plasmídeo pX330 (Addgene) [43]. Células Neuro-2A foram transfectadas com plasmídeos da CRISPR e foram submetidas ao ensaio para determinar a atividade da CRISPR. Para transcrição in vitro do RNA guia da CRISPR (sgRNA) e do RNAm da cas9, o promotor T7 foi adicionado ao template por PCR. Os produtos de PCR foram purificados utilizando o kit QiaQuick Purification (Qiagen) e serviram como template para a transcrição in vitro do sgRNA com o kit T7 Quick High Yield RNA Synthesis (New England Biolabs) e do RNAm da cas9 com o kit mMESSAGE mMACHINE T7 ULTRA (Life Technologies). Tanto o sgRNA, como o RNAm da cas9 foram purificados utilizando o kit MEGAclear (Life Technologies) e aluídos em água livre de RNase. Fêmeas C57BL/6J foram superovuladas através da injeção de 6,5 U de gonadotropina de soro de égua gravida (PMSG; Millipore, 367222) e de 6,5U de gonadotropina coriônica humana (hCG; Sigma-Aldrich, C1063) após 24 horas. As fêmeas superovuladas foram colocadas para acasalar com machos C57BL/6JJcl por um dia. No dia seguinte, óvulos fecundados foram coletados dos ovidutos da fêmea e o RNAm da cas9 transcrito in vitro (50ng/ul), assim como o sgRNA (20-50 ng/ul) serão injetados no pronucleo ou no citoplasma dos óvulos fecundados. Os embriões que receberam a injeção foram, então, cultivados em meio M16 (Sigma-Aldrich, M7292) a 37 °C e 5% de CO2. Para produção de animal mutante, embriões em estágio de duas células foram transferidos no oviduto (entre 10-20 embriões por oviduto) em fêmeas Hsd:CR (CD-1) pseudogravidas. Origem: UT Southwestern Medical Center USA Dallas, Texas. No Biotério Central em 2019 Docente Responsável: José Eduardo Krieger INCOR LIM13
Tnc (1pb)
Tnc (2pb)
nome_completo:Tnc (2pb)
background:C57BL/6
nome do alelo:Crispr/cas9 Tnc
tipo do alelo:knockout
símbolo do gene:Tnc
nome do gene:Tnc
Características (fenótipo): Alteração na pressão arterial e/ou frequência cardíaca.
Caracterização genética (genótipo): Os animais KOs foram obtidos a partir da técnica CRISPR/Cas9. Sítios alvos de CRISPR para genes de interesse foram escolhidos por meio da ferramenta CRISPR Design (crispr.mit.edu). Oligos de DNA dupla fita correspondente a cada alvo de CRISPR foram sintetizados, associados e clonados no plasmídeo pX330 (Addgene) [43]. Células Neuro-2A foram transfectadas com plasmídeos da CRISPR e foram submetidas ao ensaio para determinar a atividade da CRISPR. Para transcrição in vitro do RNA guia da CRISPR (sgRNA) e do RNAm da cas9, o promotor T7 foi adicionado ao template por PCR. Os produtos de PCR foram purificados utilizando o kit QiaQuick Purification (Qiagen) e serviram como template para a transcrição in vitro do sgRNA com o kit T7 Quick High Yield RNA Synthesis (New England Biolabs) e do RNAm da cas9 com o kit mMESSAGE mMACHINE T7 ULTRA (Life Technologies). Tanto o sgRNA, como o RNAm da cas9 foram purificados utilizando o kit MEGAclear (Life Technologies) e aluídos em água livre de RNase. Fêmeas C57BL/6J foram superovuladas através da injeção de 6,5 U de gonadotropina de soro de égua gravida (PMSG; Millipore, 367222) e de 6,5U de gonadotropina coriônica humana (hCG; Sigma-Aldrich, C1063) após 24 horas. As fêmeas superovuladas foram colocadas para acasalar com machos C57BL/6JJcl por um dia. No dia seguinte, óvulos fecundados foram coletados dos ovidutos da fêmea e o RNAm da cas9 transcrito in vitro (50ng/ul), assim como o sgRNA (20-50 ng/ul) serão injetados no pronucleo ou no citoplasma dos óvulos fecundados. Os embriões que receberam a injeção foram, então, cultivados em meio M16 (Sigma-Aldrich, M7292) a 37 °C e 5% de CO2. Para produção de animal mutante, embriões em estágio de duas células foram transferidos no oviduto (entre 10-20 embriões por oviduto) em fêmeas Hsd:CR (CD-1) pseudogravidas. Origem: UT Southwestern Medical Center USA Dallas, Texas. No Biotério Central em 2019 Docente Responsável: José Eduardo Krieger INCOR LIM13
Tnc (2pb)
Ts65Dn (Convencional)
nome_completo:B6EiC3Sn a/A-Ts(1716)65Dn/J
background:B6EiC3SnF1/J
nome do alelo:trisomy, Chr 16 translocation to Chr 17, Davisson 65
tipo do alelo:Radiation induced
símbolo do gene:Ts(1716)65Dn
nome do gene:trisomy, Chr 16 translocation to Chr 17, Davisson 65
Características (fenótipo): Importado da Jackson (#001924) pela pesquisadora Daniele de Paula Faria em 2019
Caracterização genética (genótipo): Ahmed MM; Sturgeon X; Ellison M; Davisson MT; Gardiner KJ. 2012. Loss of Correlations among Proteins in Brains of the Ts65Dn Mouse Model of Down Syndrome. J Proteome Res 11(2):1251-63PubMed: 22214338MGI: J:180732 Reeves RH; Irving NG; Moran TH; Wohn A; Kitt C; Sisodia SS; Schmidt C; Bronson RT; Davisson MT. 1995. A mouse model for Down syndrome exhibits learning and_behaviour deficits [see comments] Nat Genet 11(2):177-84PubMed: 7550346MGI: J:29232 Reinholdt LG; Ding Y; Gilbert GT; Czechanski A; Solzak JP; Roper RJ; Johnson MT; Donahue LR; Lutz C; Davisson MT. 2011. Molecular characterization of the translocation breakpoints in the Down syndrome mouse model Ts65Dn. Mamm Genome 22(11-12):685-91PubMed: 21953412MGI: J:178871
Ts65Dn (Convencional)
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